(CN109305968) 一种稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤内标试剂的制备方法

源语言标题
(CN109305968) Stable isotope labeled 6-benzyl adenine internal standard reagent preparation method
公开号/公开日
CN109305968 / 2019-02-05
申请号/申请日
CN201811551552 / 2018-12-19
发明人
WANG WEI FANG YANFEI HONG TAO
申请人
主分类号
IPC分类号
C07D-473/34
摘要
(CN109305968)
本发明涉及一种食品安全检测用稳定同位素标记6‑苄基腺嘌呤内标试剂的制备方法,属于食品安全检测用标准物质研发领域。以稳定同位素标记苯甲醛与对甲苯磺酰肼为原料,在溶剂存在作用下,得到稳定同位素标记苯甲醛与对甲苯磺酰肼缩合的中间体,在无机碱和催化剂作用下,与邻苯二甲酰亚胺反应,并最后经盖布瑞尔胺合成法一锅法得到稳定同位素标记的苄胺,然后与6‑氯嘌呤经亲核取代反应,纯化,得到稳定同位素标记6‑苄基腺嘌呤纯品。合成所需原料、中间体简单易得,目标产物稳定同位素标记6‑苄基腺嘌呤化学纯度可达98%以上,同位素丰度可达99%以上,能满足液相色谱串联质谱法所需内标试剂的技术要求。目前全球尚未发现有该结构稳定同位素标记6‑苄基腺嘌呤的制备文献,研制稳定同位素标记6‑苄基腺嘌呤对食品安全监管检测工作有重要意义。
地址
代理人
(CN109305968) ZHAO YONGQIANG ; BEIJING HUASHI INTELLECTUAL PROPERTY AGENCY LTD. Reg. Nb: 11530
代理机构
优先权号
2018CN-1551552
主权利要求
(CN109305968)
1.一种稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤内标试剂的制备方法,该稳定同位素标记的6-苄基腺嘌呤内标试剂的化学结构如式(I)所示:
 其中,(I)中R为H或D,*为12C或13C,其特征在于,制备步骤如下:
 (1)在有机溶剂存在条件下,加入稳定同位素标记苯甲醛,然后加入对甲苯磺酰肼,在氮气保护下,在20℃~120℃条件下,反应0.5~6小时;TLC跟踪反应原料反应完全后,无需处理,直接进行下一步反应;
 (2)将邻苯二甲酰亚胺、无机碱和催化剂加入步骤(1)得到的溶液中,在氮气保护下,在80℃~150℃条件下,反应1~10小时;TLC跟踪反应原料反应完全后,反应混合溶液用水淬灭,过滤,滤液用有机溶剂萃取,合并有机相,依次用饱和碳酸氢钠溶液洗涤,饱和氯化钠溶液洗涤,加入干燥剂干燥,减压蒸馏除去溶剂,残留物经柱层析得到稳定同位素标记N-苯甲基邻苯二甲酰亚胺;
 (3)将步骤(2)所得稳定同位素标记N-苯甲基邻苯二甲酰亚胺溶于有机溶剂中,加入水合肼,在氮气保护下,在80℃~150℃条件下继续反应1-8小时;TLC跟踪反应原料反应完全后,反应混合溶液用酸淬灭,过滤,滤液再用碱的水溶液洗涤,用有机溶剂萃取,合并有机相,依次用饱和碳酸氢钠溶液洗涤,饱和氯化钠溶液洗涤,加入干燥剂干燥;减压蒸馏除去溶剂,残留物经柱层析得到纯品稳定同位素标记苄胺;
 (4)在有机溶剂中,加入步骤(3)得到的稳定同位素标记苄胺,加入6-氯嘌呤,在氮气保护下,在80℃~150℃条件下继续反应6-24小时;TLC跟踪反应原料反应完全后,减压蒸馏除去溶剂,残留物用有机溶剂洗涤,得到稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤的粗品;
 (5)在混合有机溶剂中,加入步骤(4)得到的稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤的粗品,室温搅拌12-36小时,过滤,滤饼真空干燥得到稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤的纯品。
2.根据权利要求1所述的稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤内标试剂的制备方法,其特征在于所述步骤(1)中,稳定同位素标记的为氘标记的苯甲醛、13C标记的苯甲醛或氘和13C双标记的苯甲醛,有机溶剂为四氢呋喃、甲基四氢呋喃、二氧六环、甲苯、乙腈、甲基叔丁基醚中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤内标试剂的制备方法,其特征在于所述步骤(2)中,无机碱为氢氧化锂、氢氧化钠,氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、叔丁醇钠、叔丁醇钾中的一种或几种;催化剂为氯化亚铜、溴化亚铜、碘化亚铜、氧化亚铜、醋酸铜中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤内标试剂的制备方法,其特征在于所述步骤(3)中,有机溶剂为四氢呋喃、甲基四氢呋喃、二氧六环、甲苯、乙腈、甲基叔丁基醚中的一种或几种;所用酸为盐酸、硫酸、醋酸中的一种或几种;所用碱为氢氧化锂、氢氧化钠,氢氧化钾中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤内标试剂的制备方法,其特征在于所述步骤(4)中,所用稳定同位素标记苄胺为氘标记的苄胺、13C标记的苄胺或氘和13C双标记的苄胺;所用有机溶剂为正戊烷、正己烷、石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇、乙醇、乙腈中的一种或几种。
6.根据权利要求1所述的稳定同位素标记6-苄基腺嘌呤内标试剂的制备方法,其特征在于所述步骤(5)中,所用有机溶剂为正戊烷、正己烷、石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇、乙醇、乙腈中的两种或几种。
法律状态
PENDING
专利类型码
A
国别省市代码
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