不同夹带剂条件下超临界CO2萃取蜂胶黄酮的研究

2013-05-10

    蜂胶,英文名Propolis,是工蜂从植物幼芽及树干上采集来的树脂,加入自身上领腺分泌物和蜂蜡等混合而成的一种具有芳香气味的固体胶状物。峰胶的最大特点是含有丰富的黄酮类化合物,有黄酮类化合物的宝库之称。蜂胶中的黄酮类化合物具有抗菌、杀毒、稍炎、止痛、降血脂、促进组织再生和增强机体免疫能力等功效。

    目前普遍采用是酒精提取蜂胶原胶的传统工艺,但这种工艺会使蜂胶溶于酒精时产生一种多酚咖啡酸聚合物,使蜂胶的色泽变黑,口味变差,在加热回流酒精时,芳香物质、挥发油等蜂胶的重要成分易散失,降低其医疗功效

    超临界CO2提取技术被认为是当前国际上最先进的提取技术。它是一种非热提取技术,在分离纯化方面有着特殊的优势,己有工业规模的应用。由于黄酮类物质极性较大,因此用纯二氧化碳进行萃取效果不是很理想,必须选用合适的夹带剂。本文在不同夹带剂条件下对超临界CO2萃取蜂胶黄酮展开研究。

    1材料与方法

    1.1材料与试剂

    蜂胶,随州蜂产品有限公司提供,芦丁标准品,中国药品生物制品检定所提供,甲醇、无水乙醇、95%乙醇、丙酮、丁酮、乙酸乙酯均为AR,均购自围药第刚制剂有限公司。

    1.2实验仪器

    超临界流体萃取装置,江苏南通华安超临界萃取设备有限公司;UV紫外线光光度计(mini-1240),日本岛津公司;真空干燥箱(DGZ20/4-I),南京实验仪器厂。

    1.3实验方法

    1.3.1样品预处理

    将蜂胶样品冷冻粉碎,过40目筛,用石油醚抽提脱蜡,得到进行超临界萃取的样品。

    1.3.2超临界萃取

    将脱蜡蜂胶装入萃取釜,待系统达到实验设定的温度和压力时,启动夹带剂泵,开始计时。待萃取操作完成后,从分离釜中收集萃取液。

    1.3.3分析检验

    以芦丁作为标准品,用硝酸铝比色法测定黄酮类化合物的含量。

    1.3.3.1标准曲线的绘制

    J标准溶液:精密称取干燥至恒重的芦丁对照品200mg,置100mL容量瓶中,加入75%乙醇溶解,并稀释至刻度,摇匀。精密量取10mL100mL容量瓶中,用75%乙醇溶液稀释至刻度,再精密最取25mL100mL容量瓶中,用75%乙醇溶被稀释至刻度。此溶液每毫升含芦丁50μg

    标准曲线的绘制:准确量取芦丁对照液0.0mL10mL2.0mL3.0mL4.0mL5.0mL60%乙醇补足5mL,加入亚硝酸钠1mL(1.5%),摇匀,静置6min,再加入硝酸铝1.5mL(2.0%),摇匀,静置6min,再加入氢氧化钠2mL(2mol/L),加水至10mL,摇匀,静置15min,备测。在510nm,测吸光度,测定结果绘制成工作曲线。以吸光度值与对应得芦丁浓度得出吸光度值芦丁浓度标准曲线,结果见表1和图1。标准曲线的回归方程A=0.0667C-0.0698,相关系数为0.9987

    1.3.3.2蜂胶黄酮含量测定

    样品的制备:将分离釜中得到的萃取物75℃真空干燥后,精确称取14g样品,放入烧杯用95%乙醇溶解,转移到50mL,的寄量瓶并定容,再从中移取1mL,用95%乙醇定容至10mL,备用。

    测定:取1mL样液于10mL比色管中,用60%乙醇补足5mL。按标准曲线项下补足5mL”起测定黄酮,并根据标准曲线查出黄酮浓度,并计算样品中黄酮娄化合物含量。

    计算公式:

    X=C×10×10×50×10-6/W×100%

    式中X-样品中黄酮含量,%(ω)

    W-样品重量,g

    C-由标准曲线读出样液中黄酮标定浓度,μg/mL

    2结果分析

    2.1夹带剂的考察

    取脱腊蜂胶100g,萃取温度50℃,萃取压力24MPa,萃取时间3h,夹带剂用量为原料质量的10%(V/W)CO2流率固定为10L/min,改变夹带剂种类,循环萃取。结果见表2和图2

    从田2可以看出,萃取得率醇系夹带剂>混和夹带剂>酯系夹带剂>酮系夹带剂>不加夹带剂。从结果来看甲醇的得率最高,乙醇和甲醇接近,从价格和使用的安全性来考虑选择乙醇作为夹带剂。

    2.2夹带剂浓度的考察

    取脱腊蜂胶100g,萃取温度50℃,萃取压力24MPa,萃取时时间3h,夹带剂厢量为原料质量的10%(WW)CO2流宰固定为10L/min,用乙醇作为夹带剂,改变夹带剂浓度,循环萃取。结果见表3和图3

    从图3可以看出,乙醇浓度越大越有利于萃取,用95%乙醇和元水乙醇效果接近,而95%乙醇容易得到,所以选取95q,乙醇为夹带剂。

    2.3夹带剂用量的考察

    取脱腊蜂胶100g,萃取温度50℃,萃取压力24MPa,萃取时间3hCO2流率固定为10L/min,用乙醇作为夹带剂,改变夹带剂用量(夹带剂占原料质量的百分比(V/W)),循环萃取。结果见表4和图4

    从图4可以看出,萃取蜂胶中黄酮类成分,若不加入夹带剂,提取物收率较低,加入夹带剂后,萃取得率明显增加,但随着夹带剂用量继续增加,但总黄酮却有所降低,所以选取夹带剂用量为原料质量的10%(V/W)

    3结论

    本研究对不同夹带剂条件下超临界CO2萃取蜂胶黄酮展开了研究,系统地研究醇系、酮系、酯系、混合夹带剂等夹带剂对提高蜂胶黄酮得率的影响,上述各因素的影响为醇系夹带剂>混和夹带剂>酯系夹带剂>酮系夹带剂>不加夹带剂。堆合适的夹带剂为95%乙醇,夹带剂用量为10%

最新评论

暂无评论。

登录后可以发表评论

意见反馈
返回顶部